Identification et caractérisation de nouveaux isoformes humains du gène Pax-5

Abstract

L’un des éléments centraux impliqués dans la différenciation des cellules B et dans les lymphomes à cellules B est occupé par le facteur de transcription Pax-5. Afin de pouvoir jouer son rôle lors de l’activation transcriptionnelle, Pax-5 requiert son domaine de liaison à l’ADN situé au bout N-terminal, en plus de son domaine de trans-activation situé au bout C terminal. Nos travaux avaient comme objectif d’étudier la contribution du gène Pax-5 dans la différenciation des cellules B. Les résultats obtenus par séquençage ont permis d’identifier sept nouveaux isoformes du gène Pax-5. Ces isoformes sont issus de l’épissage alternatif d ’exons qui codent majoritairement au bout C terminal. Les isoformes issus de l’inclusion ou de l’exclusion des exons 7, 8 et 9 ont fait état d ’études plus approfondies. Parmi les isoformes identifiés de Pax-5, trois d ’entre eux génèrent une nouvelle séquence protéique, riche en proline, sérine et thréonine, trait caractéristique d ’un domaine de transactivation. Les isoformes de Pax-5 sont présents dans les cellules mononucléaires du sang périphérique, dans les lignées de cellules B cancéreuses et non cancéreuses, ainsi que dans les cellules B des tissus lymphatiques. Les essais de retardement sur gel ont démontré que tous les isoformes analysés possèdent un potentiel de liaison à l’ADN. Tous les isoformes étudiés ont également reconnu le site de liaison de Pax-5. Dans les essais rapporteurs, utilisant le promoteur de CD19, les propriétés au niveau de la transactivation des différents isoformes ont été significativement influencées par les changements apportés au bout C-terminal de la séquence protéique. Cette étude permet de mieux comprendre les stratégies utilisées par le gène Pax-5 afin de pouvoir réguler ces différentes cibles, tant au niveau de l’activation que de la répression, lors de la différenciation des cellules B.